乌孜别克族普遍戴花帽，妇女常在花帽外加戴头巾。男子多穿斜领、右衽、无纽扣、长可及膝的长袍，系三角绣花腰带;喜欢戴耳环、戒指、镯子、项链等装饰物。通常穿皮鞋或皮靴，外加浅帮套鞋。喜食牛、羊、马肉及其乳制品，一日三餐几乎离不开馕和奶茶。
民居形式多样，在新疆南部，多为土木结构、平顶而稍有倾斜的长方形土房;在新疆北部，与维吾尔族基本类同，也采用土木结构，顶覆泥草，稍有坡度。在牧区，冬天多住固定土房或木房，其他季节则住毡房。
旧时婚姻多由父母包办，近亲结婚普遍。现在已基本实行恋爱自由、婚姻自主、但大多要征求父母意见。男孩7岁时要举行割礼。实行无棺土葬，强调速葬、简葬。主要节日有圣纪节、肉孜节、古尔邦节等。
忌食猪肉、狗肉、驴肉、骡肉和自死畜禽肉及动物血。用餐时，严禁脱帽。不能在客人面前咳嗽、擤鼻涕或者大声说话。
交谈时忌讳伸懒腰、打哈欠、挖鼻孔、吐痰、咳嗽、打嗝、放屁等。
禁止在公共场所光着上身，不准仅穿裤衩、背心串门。不得在清真寺和墓地周围吐痰、呕吐、倒垃圾、泼脏水和大小便。
